Методы определения времени кровотечения
Главная >> Разные статьи
Длительность кровотечения является скрининговым тестом для выявления нарушений первичного гемостаза. Метод основан на определении времени кровотечения из нанесённой на поверхности кожных покровов небольшой ранки стандартного размера. Это время зависит от способности сосудисто-тромбоцитарных гемостатических механизмов останавливать кровотечение из повреждённых мелких сосудов и капилляров и поэтому его продолжительность может характеризовать состояние первичного гемостаза. Оно может быть нарушено вследствие дефектов сосудистого звена, неполноценности функциональных свойств кровяных пластинок или дефицита/дефекта плазменных кофакторов тромбоцитарных реакций (фибриногена, фактора Виллебранда), выраженной тромбоцитопении.
При снижении числа тромбоцитов менее 100х109/л имеется прямая связь между степенью тромбоцитопении и удлинением времени кровотечения. Длительность кровотечения коррелирует также с геморрагическими тенденциями при тромбоцитопатиях и болезни Виллебранда. Увеличение времени кровотечения наблюдается и при тяжёлой анемии (Ht
Помимо решения диагностических задач тест рекомендуется проводить для контроля за эффективностью применяемой гемостатической терапии, для своевременного выявления угрозы геморрагических осложнений при проведении дезагрегационной терапии. Длительность кровотечения должна быть определена у больного в период предоперационной подготовки, т.к. значительная часть больных с патологией тромбоцитарного звена гемостаза имеет скрытую форму заболевания, которая тем не менее дает тяжёлые кровотечения в ходе операции и после неё.
В настоящее время используют в основном два принципа при определении длительности кровотечения: проведение теста в условиях, не затрудняющих течение первичного гемостаза, и в условиях, препятствующих его осуществлению. К первым методам относится тест Duke, при выполнении которого колотую ранку глубиной 3,5 мм наносят скарификатором в нижней части мочки уха; выступающие капли крови осторожно, не прикасаясь к раневой поверхности, снимают фильтровальной бумагой через 15-30 с. Регистрируют время от момента нанесения укола до прекращения кровотечения, которое в норме не превышает 3 мин. Тест малочувствителен и не позволяет выявить нарушения при тромбоцитопатиях лёгкой и средней тяжести. Тем не менее этот метод должен применяться при первичном обследовании больного с неустановленной причиной первичного геморрагического диатеза. Только при неизмененных результатах теста Duke могут использоваться методы определения длительности кровотечения с применением воздействий, затрудняющих течение первичного гемостаза. При патологических исходных значениях метод Duke в дальнейшем может быть применён для оценки эффективности проводимой гемостатической терапии.
Наиболее распространёнными за рубежом методами определения длительности кровотечения второй группы являются различные модификации метода Ivy, который предложил проводить исследование на верхней конечности в условиях веностаза, затрудняющего сосудистые реакции. Веностаз достигается наложением на плечо обследуемого манжетки тонометра под давлением 40 мм рт.ст. В тесте Borchgrevink и Waaler на внутренней поверхности предплечья делают два разреза по 13 мм длиной и 1 мм глубиной. Существуют специальные приспособления, обеспечивающие стандартность наносимого повреждения. В норме длительность кровотечения из такой ранки менее 9 мин 37 с и менее 12 мин 4 с у мужчин и женщин, соответственно). После выполнения этого исследования на предплечье остаются небольшие рубцы, что затрудняет его применение с целью мониторинга.
А.С.Шитиковой предложена модификация метода Ivy (А.С.Шитикова. //Лаб. дело.-1975. — No10. — с. 597-602).
Определение длительности кровотечения проводится в условиях веностаза, но с нанесением колотой ранки в области концевой фаланги III-IV пальца. Кроме венозного застоя, повышению чувствительности метода служит второй, затрудняющий гемостаз фактор — погружение кончика пальца с нанесённой ранкой в жидкость, что позволяет оценить не только длительность кровотечения, но и объем кровопотери. Чувствительность метода значительно выше, чем теста Duke.
Техника исследования. В две пластиковых бакпечатки разового пользования наливают по 5 мл стерильного физиологического раствора пипеткой, предназначенной только для этой цели. Предплечье обследуемого свободно лежит на столе. На плечо накладываю манжетку тонометра и нагнетают воздух до 40 мм рт.ст. Это давление сохраняется в течение всего времени исследования. Обрабатывают спиртом концевую фалангу III или IV пальца и общепринятым способом с помощью скарификатора разового пользования производят укол в подушечку концевой фаланги точно на глубину 3,5 мм и одновременно включают секундомер.
Кончик пальца с нанесённой ранкой погружают в верхнюю часть раствора, наблюдают в проходящем свете за вытекающим столбиком крови, и в момент полного прекращения кровотечения выключают секундомер. В случае большой кровопотери и сильного окрашивания кровью раствора палец перед концом кровотечения переносят в другой стаканчик для точного установления момента его завершения.
С помощью пипеток на 5 и 0,2 мл (маркированных «для крови» и не используемых для другой цели) оценивают интенсивность кровотечения путём измерения добавочного объёма жидкости сверх налитых 5 мл. Определение времени кровотечения необходимо повторить два раза, но одномоментно не более двух раз, т.к. после третьего укола длительность начинает увеличиваться. Диагностическое значение имеет наибольшая из установленных величин. При значительном увеличении времени кровотечения исследование следует прекратить на 10-15 минуте, а при большой кровопотере — и раньше. В случае отрицательных результатов исследования у больных с клиническими признаками геморрагического диатеза необходимо проводить повторные определения в разные сезонные периоды и особенно во время обострения заболевания, поскольку для болезни Виллебранда и многих тромбоцитопатий характерна волнообразность в изменении показателей.
Пределы нормальных колебаний длительности кровотечения составляют у взрослых мужчин 70-196 с (Х=118 с), у женщин 87-208 с (Х=135с). Объем кровопотери — 0,01-0,40 мл. При необходимости статистической оценки полученных данных должны обрабатываться Ig значений длительности кровотечения, поскольку они у здоровых лиц имеют характер lg-нормального распределения.
Предотвращение возможных ошибок. Для минимизации нестандартности наносимого повреждения желательно, чтобы в лаборатории метод выполнял один квалифицированный лаборант. Нельзя усиливать гиперемию кожных покровов путём слишком энергичного протирания спиртом. Для устранения влияния на результат исследования спазма периферических сосудов в холодное время года больной, пришедший с улицы, должен находиться в помещении не менее двух часов. При значительном отклонении комнатной температуры от обычной (18-24°С) нужно контролировать температуру физиологического раствора, в который погружается палец, т.к. при его температуре ниже 16° и выше 33° время кровотечения удлиняется.
При первичном обследовании больные не должны принимать ацетилсалициловую кислоту и другие, отрицательно влияющие на функцию тромбоцитов лекарства, по крайней мере за 7-10 дней до исследования.
Метод не применим для оценки функции сосудисто-тромбоцитарного гемостаза при коллаптоидном состоянии, выраженной анемии.
Автор: А.С.Шитикова
Источник: Гемостаз. Физиологические механизмы, принципы диагностики основных форм геморрагических заболеваний. Под редакцией Н.Н.Петрищева, Л.П.Папаян.
Источник
В пробе Дьюка определяют время кровотечения из прокола кожи глубиной 3,5 мм. Прокол производится у нижнего края мочки уха. В норме продолжительность кровотечения составляет не более 4 мин. Существуют и более чувствительные методы, в которых время кровотечения определяется на фоне венозного стаза и повышенного давления крови в капиллярах. Для этого на плечо накладывают манжету тонометра, создавая в ней давление, равное 40 мм рт. ст. В тесте Айви на фоне такого венозного стаза прокалывают кожу на ладонной поверхности предплечья на глубину 3 мм, в методе Борхгревинка-Ва- алер делают поперечные надрезы кожи глубиной 1 мм и длиной около 8 мм. По методу Шитиковой кожу прокалывают в области концевой фаланги, после чего палец погружают в сосуд с определенным количеством подогретой воды. При этом определяют не только время кровотечения, но и количество теряемой крови. Норма времени кровотечения по Айви и Шитиковой составляет до 8 мин, по Борхгревинку-Ваалер — до 10— 12 мин. Оно удлиняется при глубоких тромбоцитопениях и многих (но далеко не всех) нарушениях функции тромбоцитов, что особенно резко выражено при болезни Виллебранда. При гемофилиях время кровотечения нормальное либо практически нормальное.
Подсчет количества тромбоцитов в периферической крови производится в камере Горяева при использовании в качестве разводящей жидкости 1%-ного раствора оксалата аммония. При подсчете пользуются микроскопом с фазовоконтрастной приставкой или с подкрашиванием. Норма тромбоцитов — 180—350 х 109/л. Возможно автоматизированный подсчет выполнять с помощью счетчиков частиц. Подсчет тромбоцитов важен для диагностики тромбоцитопений, тромбоцитопатий, протекающих с уменьшением количества тромбоцитов в единице объема крови, а также для диагностики заболеваний с интенсивным депонированием тромбоцитов в селезенке, в гигантских ангиомах, в микрососудах при их массивных дисплазиях, в очагах массивного тромбообразования и при ДВС-синдроме. Особенно значительно уменьшение количества тромбоцитов в единице объема крови при множественном микротромбообразовании, связанном с интенсивной агрегацией (слеплением) тромбоцитов.
Определение размера тромбоцитов осуществляется в окрашенном определенным красителем мазке с помощью окулярного микрометра. Тромбоциты человека по диаметру подразделяются на микроформы (менее 2 мкм в диаметре), мезоформы (2—4 мкм), макроформы (4—6 мкм) и мегалоформы (более 6 мкм). При гиперрегенераторных тромбоцитопениях с укороченной продолжительностью жизни кровяных пластинок (иммунные тромбоцитопении, формы потребления) увеличивается число крупных пластинок. При разных тромбоцитопатиях могут преобладать либо микроформы (синдром Вискотта—Ол- дрича), либо гигантские тромбоциты (аномалии Мея—Хегглина, Бернара—Сулье).
Электронно-микроскопическое исследование тромбоцитов позволяет изучить их ультраструктуру. Особое значение имеет содержание гранул разной плотности, поскольку при большой группе тромбоцитопатий в кровяных пластинках мало плотных гранул.
Сканирующая электронная микроскопия и световая микроскопия позволяют визуально оценивать изменения формы тромбоцитов, их способность распластываться и образовывать отростки, определять процесс дегрануляции (выделения веществ из гранул тромбоцитов).
Исследование адгезивности (специфическое свойство «прилипать» к чужеродной поверхности, поврежденной сосудистой стенке и лейкоцитам) тромбоцитов осуществляется путем просасывания крови с определенной скоростью через поливиниловую трубку, заполненную стандартными стеклянными шариками диаметром 0,5 мм, через косичку из стекловолокна или через трубки, заполненные коллагеном. Об адгезивности судят по уменьшению числа тромбоцитов в крови до и после фильтрации. Исследование проводится в закрытой системе, так как соприкосновение крови с воздухом, особенно в условиях перемешивания, существенно искажает результаты. Ближе к естественным условиям исследование адгезивности тромбоцитов человека в отрезке сосуда с предварительно удаленным эндотелием (внутренней оболочкой).
Показатели, соответствующие норме, свои в каждой лаборатории, поскольку результаты определения зависят от техники исследования. Нормальные показатели адгезивности тромбоцитов чаще составляют 20—50%. Диагностическое значение имеет резкое снижение (менее 10%) адгезивности, что связано либо с качественной неполноценностью тромбоцитов, либо с дефицитом в плазме фактора Виллебранда.
Исследование агрегационной функции тромбоцитов осуществляется несколькими методами: микроскопическим, фотометрическим и визуальным. Микроскопическая методика заключается в подсчете и определении величины агрегатов в плазме, богатой тромбоцитами, после добавления стимуляторов агрегации. При проведении фотометрического исследования происходит графическая или потенциометрическая регистрация процесса. При визуальном методе регистрируются момент начала агрегации и ее интенсивность. Исследования выполняют при постоянном помешивании и поддержании постоянного температурного режима. В качестве стимуляторов агрегации тромбоцитов используют адреналин, АДФ в разных концентрациях, коллаген или вытяжки из соединительной ткани, тромбин, арахидоновую кислоту, тромбоксан, ристо- мицин.
Для выявления нарушения функции тромбоцитов у детей раннего возраста существует специальная оригинальная микрометодика, требующая всего 0,4 мл плазмы. В качестве стимулятора агрегации в этом тесте используются собственные эритроциты обследуемого (данный тест носит название гемо- лизат-агрегационного).
Развернутое исследование агрегационных функций тромбоцитов имеет первостепенное значение для диагностики тромбоцитопатий, оценки действия на тромбоцитарный гемостаз различных лекарственных средств, изучения сохранности тромбоцитов при проведении плазмафереза или цитафереза, проведении метода гемосорбции, при использовании гемодиализа, а также аппаратов искусственного кровообращения. Существенное значение данное исследование имеет и для распознавания тромбофилических состояний.
Исследование спонтанной агрегации тромбоцитов в кровотоке проводится с помощью сканирующей электронной микроскопии либо по убыли из крови тромбоцитов после осаждения агрегатов. При наклонности к тромбозам, тромбоэмболиях и синдроме диссеминированного внутрисосудистого свертывания показатели нередко нарастают.
Ретракция кровяного сгустка — широко распространенный тест, характеризующий способность тромбоцитов стягивать волокна фибрина в сгустке, в результате чего объем сгустка уменьшается и из него отжимается сыворотка.
При исследовании цельной крови на показатели ретракции влияют гематокрит и содержание эритроцитов: при анемии выделяется больше сыворотки, при полиглобулиях — значительно меньше. Следует отметить, что ретракция наиболее зависит от количества тромбоцитов и их функционального состояния, а также от количества фибриногена. При глубокой тромбоцитопении сгустки не подвергаются ретракции, она нарушена и при ряде тромбоцитопатий (тромбастения Гланцманна, тяжелая уремическая тромбоцитопатия), снижена при значительной гиперфибриногенемии.
Продолжительность жизни тромбоцитов в циркуляции наиболее точно определяется с помощью радиоактивной метки.
В норме полупериод нахождений данных клеток в кровяном русле составляет 4—5 дней. При различных патологических состояниях: тромбоцитопениях, характеризующихся интенсивной убылью кровяных пластинок в тромбы и ангиомы, депонированием и размягчением этих клеток в селезенке и печени — данное время укорачивается (в тяжелых случаях до нескольких часов).
Определение антитромбоцитарных антител имеет значение для разграничения иммунных и неиммунных тромбоцитопений.
Тесты, выявляющие готовность тромбоцитов к формированию тромбов
В последние годы разрабатываются новые методы, определяющие повышенную готовность тромбоцитов к соединению в фибриновые сгустки, изменение их чувствительности к плазменным стимуляторам и ингибиторам агрегации.
К данной группе можно отнести методы определения анти- агрегационной активности сосудистой стенки.
Источник
Продолжительность свертываемости крови (СК) – это один из важных показателей, который помогает определить ее качественный состав и оценить здоровье сосудов. Выяснять длительность СК рекомендуют людям с болезнями кровеносной системы, женщинам перед родами, пациентам при подготовке к хирургическим операциям. Врач должен знать, насколько организм пациента сможет препятствовать кровопотере. Норму времени кровотечения определяют методом Панченкова, Ли-Уайта, но одним из самых эффективных можно назвать метод Дуке.
Зачем проверять?
Интенсивность кровотечения – особенно важный параметр, так как он показывает состояние сосудов, их эластичность и целостность. Этот анализ помогает оценить уровень самозащиты организма от сильной кровопотери.
Процесс свертываемости крови проходит за счет специфического белка – фибрина. Его целью является образование тромбов и быстрое сгущение крови в месте повреждения. Без этого организм не может нормально функционировать. Именно фибрин обеспечивает своевременный «ремонт» сосуда, целостность которого нарушена.
Если параметр свертываемости у больного выше или ниже нормы, то такое состояние ведет за собой серьезные последствия. Если длительность кровотечения (норма 2-3 минуты) выше указанных границ, то человек имеет все шансы потерять большое количество крови вследствие сильной травмы, глубокого пореза или при хирургическом вмешательстве.
Делать анализ на скорость свертывания требуется в следующих случаях:
- В подготовительный период перед родами,
- Перед хирургической операцией,
- При развитии аутоиммунных заболеваний,
- При геморрое,
- При варикозном расширении вен,
- При тромбозе сосудов (тромбоцитопения),
- При часто повторяющихся кровотечениях.
Особую важность этот показатель имеет для женщин. В период беременности на раннем сроке высок риск выкидыша, если этот показатель выше нормы. Аборт или выкидыш ведут за собой кровопотерю, что в отдельных случаях приводит к летальному исходу. Если женщина имеет пониженную свертываемость, то остановить кровотечение достаточно сложно. Этот фактор важен и в момент критических дней.
Для мужчин такая особенность крови может быть признаком генетической болезни – гемофилии. Это заболевание напрямую связано со свертываемостью крови, так как при гемофилии у человека полностью или частично отсутствует белок фибрин. Такой характер болезни приводит к высокой смертности детей. Современная медицина способна диагностировать гемофилию даже у новорожденных.
Чем опасна высокая свертываемость?
Важно на регулярной основе проверять скорость свертывания, норма у женщин и мужчин не должна быть меньше 2-3 минут. Если эта скорость, наоборот, повышена, то у больной растет риск развития инсульта или инфаркта миокарда.
Густой крови трудно циркулировать по сосудам, что и приводит к развитию сердечно-сосудистых заболеваний, появлению геморроидальных узлов, варикозного расширения вен. Зачастую данная патология приводит к нарушению функционированию печени и мочевой системы.
Важно! Женщины, которые принимают медикаментозные контрацептивы, имеют высокую вероятность повышения скорости коагуляции крови.
В возрасте старше 40 лет и женщинам, и мужчинам важно следить за уровнем свертываемости, потому что в старшем возрасте кровь имеет свойство сгущаться из-за нехватки воды в организме, медленного обмена веществ. На этот показатель влияют вредные привычки, неправильное питание и обезвоживание.
Если говорить о методике, определяющей скорость свертывания по Дуке, то норма у детей не должна быть выше 4 минут. Заметить проблемы с кровеносной системой можно, если у ребенка частые кровотечения из носа, раны долго кровоточат, у девочек подросткового возраста могут быть обильные менструации.
Время кровотечения по Сухареву
Забор материала проводят только натощак. Для исследования берут капиллярную кровь. После прокалывания пальца первую каплю крови удаляют. Остальной объем крови собирают в капилляр, который далее специально раскачивается в стороны. С помощью секундомера замеряется время, которое занимает образование сгустка.
Важно! Норма СК по Сухареву – 30-120 секунд.
Особенности методики Дуке
Длительность кровотечения по Дуке тоже определяют по капиллярной крови, пациенту прокалывают мочки уха или безымянный палец. Эта процедура проводится специальной иглой Франка. На место прокола через каждые 15-20 секунд прикладывают специальную бумагу, которая впитывает выделившуюся кровь. Методика достаточно эффективная и быстро проводимая. Исследование считается завершенным, когда на бумаге не остаются пятна.
Важно! Норма СК по Дуке для взрослых – 60-180 секунд.
Часто методику Дьюка используют для оценки состояния тромбоцитов. Именно эти клетки крови первыми начинают работать, если стенка сосуда повреждена. Если сосуды эластичны, то они сжимаются при повреждении и закупоривают поврежденный участок.
Если оценивать время кровотечения по Дуке, норма у детей колеблется в пределах 2-4 минут. Кроме нормы времени СК по Дуке, лаборанты определяют несколько показателей, которые показывают тромбоцитарную активность. Для того процесса проводят:
- Подсчет количества тромбоцитов,
- Оценку агрегации АДФ и тромбоцитов,
- Оценку способности тромбоцитов вступать в реакцию с коллагеном и адреналином,
- Оценку активности фактора Виллебрандта.
Этот метод исследования разработал американский ученый Вильям Дьюк. Открытие пришлось на начало XX века, но в те времена кровь исследовали только из мочки уха.
Метод определения свертываемости по Ли-Уайту
Данная методика помогает оценить, на сколько быстро венозная кровь сворачивается в пробирке. Главная цель анализа – определение начального этапа гемостаза, а именно возникновение протромбиназы. Этот показатель очень важен. Он зависит от:
- состояния стенок сосудов,
- уровня тромбоцитов,
- концентрации плазменных белков.
Скорость СК зависит от техники проведения исследования:
- в пробирке из стекла кровь сворачивается за 4-7 минут,
- в силиконовой пробирке СК занимает 15-25 минут.
Метод Ли-Уайта очень простой и может использоваться в любой лаборатории. Специалист должен взять у пациента 3 мл крови с вены и распределить ее по трем пробиркам. Затем их ставят в специальный штатив, наклоненный под углом 50°, и на секундомере засекают время, за которое кровь полноценно свернется. Время останавливают в тот момент, когда кровь перестает вытекать.
Важно! Процесс свертывания начинается в тот момент, когда из вены вытянут иглу. Поэтому нужно вовремя включить секундомер.
Если СК неправильное, нужно срочно найти причину этих нарушений. Любое отклонение может сигнализировать о наличии у пациента серьезной патологии.
Метод Моравица
Предполагает использование капиллярной плазмы. За 2-3 часа до забора материала пациент должен отказаться от еды. Перед процедурой ему нужно выпить стакан чистой воды.
Медицинский работник помещает образец крови на лабораторное стекло. Каждые полминуты ее проверяют с помощью стеклянной трубки. Время возникновения нити фибрина считают результатом проверки. Согласно нормам, СК должно занять 3-5 минут.
Проводить оценку свертываемости можно по Уайту, Дуке или Панченкову. Все указанные методы способны характеризовать уровень коагуляции, но лаборатории, где проводятся анализы, могут иметь разные нормативы. Важно сдавать анализ в одной лаборатории, чтобы правильно составлять или сравнивать таблицы с результатами.
Что делать при отклонениях нормы
Плохая свертываемость может быть признаком дефицита витамина К. Чтобы восполнить его, пациенту нужно разбавить свой рацион:
- шпинатом,
- салатом,
- брокколи,
- морковью,
- бобовыми,
- гречкой.
Также полезно употребление:
- капусты,
- кориандра,
- зелени,
- редиса,
- красного перца,
- миндаля и грецких орехов.
Из напитков будет полезным сок граната и светлого винограда.
Если кровь очень густая и быстро сворачивается, ее можно разжиlить с помощью:
- жирной рыбы (скумбрии, ставриды, мойвы или зубатки),
- рыбьего жира,
- овса,
- огурцов,
- лимона,
- топинамбура,
- 30-50 мл натурального красного вина.
Устранить тромбы можно с помощью репчатого лука и чеснока, но их нужно правильно употреблять:
- Чеснок порезать на тонкие кусочки и немного подвялить на воздухе.
- Лук проваривать в воде или бульоне.
Решать, уменьшить высокую свертываемость или, наоборот, ее повысить – это задача врача. Самостоятельно принимать, назначать или отменять прием лекарственных средств запрещается.
Загрузка…
Источник
