Метод определения свертывания крови и кровотечениях
Метод Ли-Уайта
(время свертывания венозной крови)
Подготавливают
водяную баню с температурой 37 град.
Цельсия, секундомер. Из вены забирают
1 мл крови, помещают в пробирку, которую
устанавливают на водяную баню и включают
секундомер. Через 2 минуты, а затем через
каждые 30 секунд пробирку наклоняют под
углом 45 градусов и наблюдают образование
плотного сгустка (кровь не выливается
при переворачивании пробирки). Время
свертывания регистрируют от момента
ее взятия до образования плотного
сгустка. В норме 5-10 минут.
Метод Бюркера
(свертывание капиллярной крови)
На стекле смешиваются
равные по объему капли крови и
дистиллированной воды. Включается
секундомер и путем помешивания
образовавшейся смеси регистрируется
образование нитей фибрина.
Определение времени кровотечения по Duke
Определить
время и интенсивность кровотечения по
Дюку. Обработать палец
спиртом или эфиром. Сделать прокол
мякоти пальца на глубину 3-3,5мм.
Включить секундомер и снимать капли
фильтровальной бумагой каждые
30 сек. Секундомер выключается в тот
момент, когда на бумаге не
останется следа крови. В норме время
кровотечения равно 2-4 мин.
Для
определения интенсивности кровотечения
число капель крови на фильтровальной
бумаге делят на время кровотечения. В
норме она равна 2-3.
Увеличение
времени кровотечения и интенсивности
свидетельствует о нарушении
сосудисто-тромбоцитарного гемостаза.
Определение осмотической стойкости эритроцитов
Известно,
что в гипотонических растворах эритроциты
набухают и лопаются,
в результате чего гемоглобин выходит
в окружающую среду. Это
явление называется гемолизом. В крови
человека имеются эритроциты,
обладающие различной устойчивостью к
действию гипотонических
растворов. Необходимо определить
максимальную концентрацию хлористого
натрия, при которой начинается (минимальная
осмотическая
стойкость) и заканчивается (максимальная
осмотическая стойкость)
гемолиз. С этой целью из рабочего (1%)
раствора хлорида натрия
готовится серия разведений по следующей
схеме:
Вода | 0,1 | 0,2 | 0,3 | 0,4 | 0,5 | 0,55 | 0,6 | 0,62 | 0,65 | 0,7 |
1%р-р | 0,9 | 0,3 | 0,7 | 0,6 | 0,5 | 0,45 | 0,4 | 0,38 | 0,35 | 0,3 |
Полученная (%) | 0,9 | 0,8 | 0,7 | 0,6 | 0,5 | 0,45 | 0,4 | 0,33 | 0,35 | 0,3 |
В
каждую пробирку вносится по капле крови,
которую тотчас же перемешивают
с раствором и оставляют стоять при
комнатной температуре
в течение 10 мин. Для здоровых людей
верхняя (минимальная)
граница осмотической стойкости
соответствует 0,42-0,48% NаСl.
При этом разрушаются наименее устойчивые
к осмотическому давлению
эритроциты. Полный же гемолиз (максимальная
граница стойкости)
происходит при 0,30-0,34% NаСl.
Расшифровка агрегатограммы
Агрегатограмма
записывается с помощью прибора,
получившего название
агрегометр. К сожалению, мы не можем
воспользоваться на занятиях
этим прибором, ибо у нас он предназначен
лишь для научной работы.
Принцип записи агрегатограммы основан
на изменении оптической
плотности плазмы, содержащей тромбоциты,
в которую вносится
один из агрегирующих агентов (АДФ,
адреналин, коллаген, тромбоксан
А2, антибиотик ристомицин и др.). При этом
регистрируется кривая,
схема которой изображена на рисунке. В
норме агрегатограмма носит двугорбый
характер, хотя в зависимости от дозы
агрегирующего агента
можно получить и одногорбую прямую, а
также агрегацию с последующей
дезагрегацией (возвращение кривой к
исходной величине) (см.
рисунок).
Обычно
агрегатограмма включает в себя латентный
период АВ (момент
внесения агрегирующего агента до начала
записи агрегатограммы),
величину максимальной амплитуды (МА),
угол агрегации,
время наступления максимальной агрегации
и время дезагрегации
(СД), если он наступает.
В
норме для первой волны индекс агрегации
(процент агрегированных тромбоцитов)
равен 25-35%, время агрегации колеблется
в пределах 30-35
сек, угол агрегации 60-65 градусов.
Нормы
для второй волны агрегации: индекс
агрегации — 60-70%, время агрегации
— 90-100 сек, угол агрегации — 50-60 градусов.
После
помещения индуктора в норме агрегация
должна наступать не позднее,
чем через 20-30 сек. (АВ). Следует помнить,
что цена данного деления
на агрегатограмме равна 20 сек (1 см
ленты). Как правило, врачу необходимо
обнаружить значительные нарушения
агрегации. Они могут выражаться
в отсутствии агрегации, ее чрезмерно
низкой амплитуде, длительном
латентном периоде. При повышении
агрегационной активности
тромбоцитов наступает спонтанная (без
внесения индуктор) агрегация.
Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]
- #
- #
- #
- #
- #
- #
- #
- #
- #
- #
- #
Источник
Определение времени свертывания крови В клинической практике могут быть использованы два метода:
- метод Ли—Уайта (для венозной крови);
- метод Сухарева (для капиллярной крови).
Определение времени свертывания венозной крови. Подготавливают водяную баню температурой 37 °С, сухую серологическую пробирку и секундомер. 1 мл венозной крови, взятой из локтевой вены обследуемого сухим и стерильным шприцем, помещают в серологическую пробирку, одновременно включают секундомер. Пробирку устанавливают в водяную баню. Через 2 мин после взятия крови, а затем через каждые 30 с пробирку наклоняют на 45°, при этом желательно не выносить пробирку из воды. В момент, когда образуется плотный сгусток и кровь не выливается при переворачивании пробирки вверх дном, определение заканчивают. Время свертывания крови регистрируют от момента взятия ее до появления плотного сгустка. В норме время свертывания крови, взятой из вены, составляет от 5 до 10 мин. Определение времени свертывания к а п и л л я р н о й к р о в и. При проведении исследования рекомендуют выполнять следующие методические указания: 1) использовать абсолютно сухие и химически чистые капилляры к аппарату Панченкова; 2) изменять угол наклона капилляра с взятой кровью только в заданных пределах (30—45°) плавно, без рывков; 3) проводить исследование при температуре комфорта.
После укола в палец 1-ю каплю крови удаляют. В капилляр для определения скорости оседания эритроцитов сплошным столбиком набирают 25 мм крови. Включают секундомер. Путем наклона капилляра на 45—50° переводят взятую кровь на его середину. Капилляр оставляют в горизонтальном положении в руке. Затем через каждые 30 с наклоняют капилляр на 30—45° (лучше, если угол наклона всегда один и тот же) сначала в одну сторону, затем возвращают капилляр в горизонтальную плоскость и через 30 с вновь наклоняют его, но уже в другую сторону. При наклоне капилляра следят за тем, чтобы столбик крови смещался не более чем на 10 делений. Свободное передвижение крови в капилляре свидетельствует о том, что свертывание еще не наступило. Замедление движения крови или появление капилляра на стенке небольших сгустков крови свидетельствуют о наличии свертывания крови. Окончание процесса свертывания регистрируют в момент полной остановки движения крови. В норме время свертывания капиллярной крови: начало от 30 с до 2 мин; конец — от 3 до 5 мин.
Определение длительности кровотечения (уколочная проба Дуке). Наносят более глубокий, чем обычно, укол в палец (3 мм). Через каждые 30 с полоской фильтровальной бумаги прикасаются к капле крови (1-ю каплю не удаляют! ). Постепенно капли крови на бумаге становятся все меньше и в конце концов исчезают. Время кровотечения подсчитывают по количеству капель на фильтровальной бумаге, снятых через известные промежутки времени. В норме время кровотечения равно 2—4 мин.
Определение ретракции кровяного сгустка. 10 мл крови, взятой из вены, помещают в градуированную пробирку и оставляют при комнатной температуре на 24 ч. В процессе свертывания крови образуется сгусток, постепенно уплотняющийся при этом отделяется сыворотка. Через сутки учитывают степень уплотнения сгустка и количество отделившейся сыворотки. В норме уплотнение сгустка заканчивается в течение 18—24 ч, а количество Отделившейся сыворотки составляет от объема взятой для определения крови. Индекс ретракции определяют путем деления объема отделившейся сыворотки на общий объем взятой для исследования крови. В норме индекс ретракции равен 0, 3—0, 5.
Удлинение времени свертывания крови, длительности кровотечения, замедление или отсутствие ретракнии кровяного сгустка может иметь место при геморрагических диатезах.
Изображение в начале статьи взято с :
Источник
Определение
времени свертывания крови.
Свёртывание
крови in
vitro
обусловлено внутренним механизмом,
запускаемым за счёт контактной активации
фактора XII
(Хагемана). В норме свёртывание капиллярной
крови начинается через 0,5 – 2 минуты,
заканчивается через 3 – 5 минут. Свёртывание
крови, взятой из вены, составляет 5 – 10
минут. Удлинение времени свёртывания
отмечается при гипокоагуляции (гемофилии,
лечение антикоагулянтами), укорочение
– при гиперкоагуляции.
ХОД
РАБОТЫ: после прокола пальца, первая
капля удаляется, в капилляр Панченкова
набирается 25 мм крови, включается
секундомер. Путём наклона капилляра на
45º кровь переводится на его середину,
затем, через каждые 30 секунд, капилляр
наклоняется на 45º в одну сторону,
возвращается в горизонтальное положение,
через 30 секунд наклоняется в другую
сторону. Отмечается момент замедления
движения крови и появления на стенке
капилляра микросгустков. Окончание
процесса свёртывания – момент полного
прекращения движения крови.
Определение
времени остановки кровотечения.
В
норме время остановки кровотечения не
превышает 4 мин. Удлинение при
тромбоцитопениях и тромбоцитопатиях
(нарушениях функциональных свойств
тромбоцитов).
ХОД
РАБОТЫ: производится прокол кончика
пальца скарификатором. Включается
секундомер, каждые 30 секунд фильтровальной
бумагой снимается капля крови, выступившая
самостоятельно (без надавливания). После
остановки кровотечения секундомер
останавливается, палец обрабатывается
настойкой йода.
Определение
протромбинового времени.
Протромбиновый
тест Квика характеризует процесс
свёртывания крови при его запуске по
внешнему механизму и имеет исключительное
значение для определения активности
фактора VII.
ХОД
РАБОТЫ: В капилляр Панченкова набирается
раствор цитрата натрия до отметки «80»,
производится прокол пальца и в тот же
капилляр (не удаляя цитрат натрия)
набирается кровь, пока уровень набранной
смеси не достигнет метки «0» («К»).
Содержимое капилляра переносится в
пробирку, которая помещается в водяную
баню на 1 минуту. В пробирку с цитратной
кровью вносится раствор тромбопластина
капилляром Панченкова, заполненным до
метки «0» («К»), и такое же количество
раствора хлорида кальция. Включается
секундомер. Пробирка в водяной бане
осторожно покачивается. Секундомер
останавливается в тот момент, когда
образуется сгусток крови. Полученное
значение – «протромбиновое время»
(ПВ).
Зная
ПВ испытуемого (ПВИ) и нормальное
протромбиновое время (ПВН), которое
зависит от активности стандартного
тромбопластина (оно бывает указано на
флаконе, обычно 12 – 18 секунд; проверяется
на нескольких образцах донорской крови),
можно рассчитать протромбиновый индекс
(ПИ): ПИ = ПВН / ПВИ * 100.
В
норме ПИ составляет 90-100%. Чем больше
протромбиновое время, свидетельствующее
о гипокоагуляции крови, тем меньше
значения протромбинового индекса.
10. Определение порогов пространственной тактильной чувствительности.
Пространственный
порог тактильной чувствительности –
это
расстояние между ножками эстезиометра
в мм, при котором испытуемый впервые
различает двойное прикосновение.
Наибольшие пространственные пороги
тактильной чувствительности (площадь
поверхности, иннервируемая одним
афферентным волокном) на спине, наименьшие
– на кончиках пальцев, языке.
ЦЕЛЬ:освоить
методику измерения пространственного
порога тактильной чувствительности.
ОСНАЩЕНИЕ:циркуль
Вебера, линейка.
Ход
работы:расстояние
между ножками эстезиометра (циркуля
Вебера) устанавливают 1 мм и прикасаются
к различным участкам кожи (пальцы рук,
шея, спина, нос) испытуемого, который
сидит на стуле с закрытыми глазами.
Затем расстояние между ножками
эстезиометра увеличивают на 1 мм и
продолжают прикосновения к участкам
кожи в первоначальной последовательности.
Отмечают момент, при каком расстоянии
между ножками эстезиометра и на каком
участке кожи испытуемый впервые различает
двойное прикосновение.
Соседние файлы в предмете Нормальная физиология
- #
- #
- #
- #
- #
- #
- #
- #
- #
Источник
Свертываемость крови обусловлена белком под названием фибрин. Его деятельность заключается в формировании тромбов и сгущении крови. Коагуляция очень важна для нормальной работы всего организма, поскольку именно она позволяет избежать потери жидкости и форменных элементов при различного рода повреждениях. Если анализ крови на свертываемость и длительность кровотечения показал какие-либо отклонения, то врачам необходимо как можно быстрее установить причину этой ситуации, так как последствия бывают различные, вплоть до летального исхода. Этим обусловлена потребность контроля свертывающей функции крови, а также наблюдение за сосудами. Нормальной длительностью кровотечения считается 2-3 минуты после выполнения забора биологической жидкости для анализа.
Для чего знать время свертываемости
Время свертываемости описывает несколько функций системы гемостаза – насколько быстро образуются тромбы, способность тромбоцитов прилипать друг к другу, а также дает информацию врачу о том, за какое время при нарушении целостности сосудистых стенок организмом будет заделана течь. За это время фибриноген превращается в фибрин, формируя «пробку», что препятствует большим потерям биологической жидкости.
Исследование длительности кровотечения, анализ на развернутую коагулограмму выполняют при:
- предродовом периоде, поскольку возможны осложнения.
- перед выполнением средних и больших оперативных вмешательств.
- хронических кровопотерях по причине таких патологий, как геморрой, синдром Малори-Вейсса, эрозиях органов пищеварения, предраковых и раковых состояниях.
- тромботических нарушениях, в том числе при варикозном расширении вен.
- аутоиммунных состояниях.
Снижение свертываемости крови обуславливает риск длительных кровопотерь во время хирургических операций или по причине травм. Потеря большого количества форменных элементов и плазмы грозит организму и его жизнедеятельности. Особую группу риска формируют женщины в послеродовом периоде, во время месячных.
Другой таковой группой являются мужчины с таким заболеванием, как гемофилия, которая подразумевает отсутствие некоторых белков, которые обуславливают гемостаз. При этом представительницы слабого пола являются лишь переносчиками генов этой патологии. Снижение коагуляции также встречается на фоне сахарного диабета или регулярного приема антиагрегантов, антикоагулянтов.
Важно понимать, что гиперкоагуляция также не считается вариантом нормы, поскольку высока вероятность развития так называемых сосудистых катастроф – тромбозов любой локализации, в том числе инфарктов и ишемических инсультов. Это связано с формированием сгустков внутри сосудистого русла, которые закупоривают ток крови по сосудам, из-за чего развивается некроз ткани, которая питалась этой магистралью.
Другими результатами гиперкоагуляции являются варикозная болезнь, развитие геморроя и другие заболевания. Формирование повышенной свертываемости обусловлена обезвоживанием, патологиями почек, печени, а у женщин она иногда отмечается на фоне приема оральных гормональных противозачаточных средств.
Длительность кровотечения в норме
Показатель свертываемости крови у женщин и мужчин одного возраста обычно одинаковый. Исключение составляет лишь период беременности. Но у детей и пожилых лиц он несколько разнится в виду гормональных перестроек. Вынашивание малыша отличается тем, что свертывание становится более активным, поскольку система гемостаза здесь отвечает сразу за два организма и должна более активно реагировать на возникшие проблемы.
У деток первого года жизни свертываемость крови также другая, а у новорожденных ПТВ растет на 2-3 секунды. У недоношенных малышей протромбиновое время также не несколько секунд выше.
Основными компонентами коагулограммы считаются такие показатели.
- Количество тромбоцитов, которое не должно опускаться менее 150 г/л. У взрослого человека верхняя граница нормы составляет 380 г/л, у малышей – 320-350.
- Время свертываемости по Сухареву подразумевает забор крови из пальца. Начало этого процесса наступает по истечении 30-150 секунд, максимальная допустимая длительность 6 минут, однако за норму врачи считают 5 минут, то есть 300 секунд.
- Анализ по Ли-Уайту подразумевает изучение этого показателя по венозной крови. Сколько она будет останавливаться – зависит от индивидуальных особенностей организма, но нормальной величиной считается 5-10 минут.
- Также забор из пальца осуществляется при определении времени по Дуке, патологией является время от 4 минут.
- Забор биологического тестируемого материала из вены необходим для изучения тромбинового времени, допустимые границы – 15-20 секунд.
- Протромбиновый индекс можно определить и по капиллярной, и по венозной крови. В первом случае целевые значения составляют 90-105%, а во втором – 93-107%.
- АЧТВ – активированное частичное тромбопластиновое время. Допустимые цифры – 30-50 секунд.
- Фибриноген – белок, из которого образуется фибрин. У деток первых дней жизни его количество составляет 1.5-3 г/л, а у взрослых – 2-4 г/л.
Время коагуляции по Сухареву
Забор крови осуществляют из пальца, лучше всего производить его натощак или спустя несколько часов после приема пищи. Каких-либо особых рекомендаций по подготовке пациента к этому тесту нет. Важно лишь то, чтобы это была именно капиллярная кровь. Время коагуляции по Сухареву не отображает активность тромбоцитов в крови или за сколько секунд венозная кровь свернется.
Первая полученная капля удаляется тампоном, после чего лаборант ждет появления следующей, которую необходимо поместить в специальную колбу. Ее качают поочередно в обе стороны. Этот процесс засекается секундомером. Как только биологическая жидкость застынет, часы останавливают, а период от старта до финиша является время свертываемости. Обычно оно занимает от 30 до 120 секунд в норме.
С момента формирования фибрина до окончания самого свертывания не должно пройти более 5 минут. Эта методика позволяет определить этап формирования фибрина из фибриногена, когда он перестает быть растворимым.
Метод Моравица
Эта методика определения коагуляции крови применяется достаточно широко и сегодня, при этом она очень легкая. Забор крови по Моравицу производят натощак, подготовка требует исключения употребления спиртных напитков за 2-3 суток до проведения теста. Также не рекомендовано курить, пить кофе в день проведения анализа. Врачи советуют пить только воду, что повышает точность и эффективность исследования.
На предметное стекло лаборант помещают каплю крови, которая была взята из пальца. Затем запускается секундомер. Каждые 30 секунд в эту каплю помещают стеклянную трубку. Как только за ней будет видна нить фибрина, измерение останавливается, а полученное время является результатом анализа по Моравицу. Норма находится в диапазоне 3-5 минут.
Метод свертываемости по Дуке
Эта методика, изучающая гемостаз, также требует проведения забора крови натощак, желательно в утренние часы. Пациенту прокалывают мочку уха при помощи специальной иглы, которая называется игла Франка. Каждые 15 секунд к месту прокола прикладывается бумага. Как только на ней больше не остается следов крови, тестирование завершается. Нормальные показатели подразумевают остановку кровотечения за счет формирования нитей фибрина, сгустков и тромбов за 1-3 минуты.
Свертываемость по Ли-Уайту
Методика оценки показателей системы гемостаза по Ли-Уайту подразумевает время, за которое свернется венозная кровь в пробирке. Здесь нет необходимости брать у пациента капиллярную кровь из пальца.
Целью этого анализа является максимально точное определение первой стадии свертывания, когда формируется протромбиназа. Этот момент играет очень большую роль и важен для врачей, поскольку он зависим от нескольких факторов, среди которых:
- проницаемость стенки сосуда;
- количество плазменных белков;
- уровень тромбоцитов и других форменных элементов, которые способны к агрегации.
Соотношение вышеуказанных компонентов считается ключевым звеном гемостаза для здорового человека. Время свертываемости по Ли-Уайту иногда может отличаться. Это обусловлено условиями и техники выполнения процедуры. В обычной лабораторной стеклянной пробирке оно составляет 4-7 минут, а из-за того, что другие материалы имеют иные физические свойства, длительность тест в них растет до 15-25 минут. Повышение свертываемости укажет на наличие чрезмерной активности первого звена гемостаза.
Основные причины отклонения от нормы
Изменение показателей времени свертываемости крови говорит о развитии различных патологических процессов в организме. Наиболее часто причины повышенного результата анализа системы гемостаза свидетельствуют о таких патологиях.
- Заболеваниях печени, особенно стадии декомпенсации цирроза, гепатита, онкологических состояний, когда паренхима органа оценивается как несостоятельная.
- Дефиците факторов свертывания, либо же об их неполноценности, что приводит к тому, что нормальных белков содержится пониженное количество и для обеспечения нормальной коагуляции их попросту не хватает.
- Терминальные стадии синдрома диссеминированного внутрисосудистого свертывания.
Удлинение показателя также отмечается тогда, когда пациент находится на приеме антикоагулянтов и антиагрегантов, гепаринотерапии. Это обуславливает необходимость проведение анализов им чаще, чем здоровым людям. Например, при регулярном употреблении варфарина, требуется ежемесячный контроль МНО.
Укорочение показателей гемостаза отмечается при следующих патологиях.
- Начальных этапах синдрома диссеминированного внутрисосудистого свертывания, эта стадия называется гиперкоагуляцией.
- Заболеваниях, которые отмечаются повышенным риском тромбоза – гипертоническая болезнь, атеросклероз, дислипидемия с повышением показателей холестерина, различные тромбозы, тромбофилии, варикозная болезнь.
- Длительном приеме оральных гормональных противозачаточных средств.
- Наличии таких вредных привычек, как табакокурение и употребление алкоголя.
- Обезвоживании.
- На фоне длительного приема кортикостероидов, которые способны влиять абсолютно на все протекающие в организме процессы.
Важно понимать, что лабораторные условия несколько отличаются от таковых внутри замкнутой системы организма, поскольку при определении состояния системы гемостаза одномоментно оценивается лишь один показатель, в то время как внутри гомеостаза организма на свертываемость влияют сразу все факторы. Это обуславливает необходимость изучения сразу нескольких показателей для оценки общей картины.
Источник